Ako extrahovať banánovú DNA?
Molekuly DNA boli oddelené od zvyšku banánu, takže roztlačený banán už nie je potrebný.
DNA alebo kyselina deoxyribonukleová je v každom živom organizme na Zemi, vrátane všetkých ľudí a rastlín. DNA je potrebná, pretože poskytuje pokyny pre všetky bunky v organizme, ktoré jej hovoria, ako rásť a čo robiť. Tieto pokyny sú poskytované prostredníctvom segmentov DNA, ktoré sa nazývajú gény. DNA je taká malá, že ju nemožno vidieť voľným okom. Existuje však spôsob, akým môžete extrahovať dostatočne veľký materiál DNA z ovocia, ako sú banány, kivi alebo jahody. Tento experiment sa dá ľahko vykonať doma a pravdepodobne už máte väčšinu vecí potrebných na experiment.
Časť 1 z 3: vytvorenie roztlačenej banánovej zmesi
- 1Vložte fľašu izopropylalkoholu do mrazničky. Pred začatím experimentu vložte fľašu izopropylalkoholu do mrazničky. Môžete tiež vyliať trochu alkoholu z hlavnej fľaše, do ktorej prišiel, a vložiť ho do prázdnej, čistej fľaše alebo pohára a potom fľašu alebo pohár vložiť do mrazničky. Nebojte sa, izopropylalkohol v skutočnosti nezmrazí pevnú látku ako voda.
- Na tento experiment skúste použiť 90% alebo viac izopropylalkoholu. Ak však už máte doma aspoň 70%izopropylalkoholu, môžete ho použiť.
- Ak nemáte žiadny izopropylalkohol, môžete si ho kúpiť v lekárni alebo v lekárni; je to dosť lacné.
- 2Uistite sa, že máte na tento experiment zrelý banán. Budete musieť banán roztlačiť na niečo, čo vyzerá ako puding. Preto potrebujete, aby bol banán skutočne mäkký a zrelý. Viete, že je naozaj zrelý, keď je vonkajšia strana banánu tmavožltá alebo hnedá a sú na nej čierne škvrny. Banány odlúpnite zvonku a rozlomte alebo odrežte asi polovicu banánu pre svoj experiment.
- Ak nemáte žiadne zrelé banány, nechajte jeden na pulte, kým nie je takmer hnedý, než urobíte tento experiment.
- Mixér môžete použiť aj na roztlačenie banánu, ak nechcete čakať, kým dozreje.
- 3Rozdrvte banán do plastového uzatvárateľného mraziaceho vrecka. Časť banánu, ktorú ste odlomili, vložte do plastového uzatvárateľného vrecka. Zaistite, aby z vrecka bol všetok vzduch, a potom ho uzatvorte. Rukami roztlačte banán, kým nebude vyzerať ako puding. Roztlačenie banánu týmto spôsobom by vám malo trvať minútu alebo dve. Uistite sa, že všetky hrudky sú roztlačené.
- Môžete tiež skúsiť roztlačiť banán vo vrecku valčekom. Jednoducho posúvajte valček tam a späť po vrecku, kým nie je všetko rozdrvené.
Banány odlúpnite zvonku a rozlomte alebo odrežte asi polovicu banánu pre svoj experiment. - 4V odmerke zmiešajte horúcu vodu a soľ. Pour teplej vody priamo z kohútika do odmerky až máte 1/2 c (120 ml). Lyžičkou premiešajte vodu s 1 lyžičkou (4,9 ml) soli, kým sa soľ úplne nerozpustí. V tomto kroku sa používa soľ, pretože má kladný elektrický náboj. Na druhej strane má DNA negatívny elektrický náboj. Keď sa spoja, negatívne a pozitívne náboje sa vyrovnajú a umožnia molekulám DNA zhromaždiť sa spoločne.
- Uistite sa, že použijete skutočne horúcu, parnú vodu z faucetu.
- Dávajte pozor, aby ste s odmerkou držali iba za rukoväť, ak je skutočne horúca.
- Na tento krok bude fungovať akýkoľvek druh soli. Jemnejšia kuchynská soľ sa však rozpustí rýchlejšie ako kusovejšia morská soľ.
- 5Mix slanej vody s roztlačeným banánom 30-45 sekúnd. Znovu otvorte plastové uzatvárateľné vrecko a opatrne nalejte zmes slanej vody do vrecka s roztlačeným banánom. Vrecko znova uzatvorte a odstráňte čo najviac vzduchu. Rukami pohybujte a potraste sáčkom, aby ste spolu zmiešali slanú vodu a banán. Miešajte obsah vrecka asi 30-45 sekúnd.
- Pred naliatím do plastového vrecka možno budete musieť nechať zmes slanej vody trochu vychladnúť.
- Ak je vrecko príliš horúce na to, aby sa s ním dalo manipulovať, akonáhle je voda vo vnútri, držte ho pomocou rukavíc na pečenie.
- 6Do vrecka pridajte tekuté mydlo na riad a zmiešajte s banánom/slanou vodou. Pomocou odmerka na meranie 1/2 čajové lyžičky (2,5 ml) tekutého mydla riadu. Znovu otvorte plastové uzatvárateľné vrecko a nalejte tekuté mydlo na riad. Vrecko znova uzatvorte a odstráňte čo najviac vzduchu. Rukami jemne pohybujte vreckom a vmiešajte tekuté mydlo do zmesi banán/slaná voda. Mydlo použité v tomto kroku rozpustí lipidy (alebo tuky) v bunkových membránach okolo molekúl DNA. To umožní oddelenie molekúl DNA v zmesi.
- Obsah vrecka jemne premiešajte. Chcete rozpustiť všetko mydlo v zmesi banán/slaná voda bez toho, aby ste vytvorili veľa bubliniek.
- Namiesto mydla na riad môžete použiť aj šampón.
Časť 2 z 3: Izolácia banánovej DNA
- 1K vrchnej časti úzkeho pohára pomocou gumičky pripevnite kávový filter. Zasuňte papierový kávový filter do hornej časti vysokého, úzkeho nápojového pohára. Zložte hornú časť kávového filtra cez okraj pohára a zaistite ho na mieste gumičkou.
- Napriek tomu, že ste filter zaistili gumičkou, pravdepodobne budete musieť rukou držať filter na mieste, akonáhle cez neho začnete liať veci.
Tekutina prúdiaca cez kávový filter je v podstate mydlová slaná voda, ktorá obsahuje molekuly DNA banánu. - 2Nalejte obsah vrecka do pohára. Otvorte plastové uzatvárateľné vrecko so zmesou banánov, slanej vody a mydla a pomaly nalejte túto zmes do vysokého úzkeho pohára cez kávový filter. Nedovoľte, aby filter pretekol; choď pomaly. Dokončenie tohto procesu môže trvať niekoľko minút. Roztlačený banán zostane vo filtri, zatiaľ čo tekutina bude filtrovať cez sklo.
- Tekutina prúdiaca cez kávový filter je v podstate mydlová slaná voda, ktorá obsahuje molekuly DNA banánu.
- Molekuly DNA boli oddelené od zvyšku banánu, takže roztlačený banán už nie je potrebný.
- Akonáhle všetka kvapalina prejde filtrom, môžete filter a jeho obsah vyhodiť.
- 3Do nakloneného úzkeho skla pomaly pridajte izopropylalkohol. Vyberte izopropylalkohol z mrazničky. Zdvihnite vysoké, úzke sklo svojou nedominantnou rukou a nakloňte ho v 45-stupňovom uhle na jednu stranu. Dominantnou rukou nalejte izopropylalkohol tak, aby pomaly stekal po stene pohára. Zastavte prilievanie, keď je na vrstve tekutej zmesi, ktorú ste prefiltrovali do pohára, vrstva izopropylalkoholu hrubá asi 2,5 až 5,1 cm.
- Nelejte izopropylalkohol priamo do tekutiny, ktorá je v pohári.
- Po dokončení by ste mali vidieť dve odlišné vrstvy tekutiny; banán/mydlo/slaná voda na dne a alkohol na vrchu. Molekuly DNA sú v súčasnosti rozpustené v zmesi banán/mydlo/slaná voda.
- 4Pohár nechajte na pulte najmenej 8 minút. Sklopte vysoké úzke sklo a položte ho na pult. Nastavte časovač na 8 minút a nedotýkajte sa skla. Počas 8 minút sledujte pohár, či neobsahuje bubliny a pohyb. Ako bolo uvedené, molekuly DNA sú v súčasnosti rozpustené v zmesi banán/mydlo/slaná voda. Kombinácia alkoholu a soli spôsobuje, že sa tieto molekuly DNA vyzrážajú alebo sa vyvinú na pevnú látku. Alkohol vložíme do mrazničky, pretože nižšie teploty umožňujú tvorbu ďalších molekúl DNA.
- Pohár môžete nechať dlhšie ako 8 minút. Čím dlhšie ho necháte, tým bude materiál DNA definovanejší.
Časť 3 z 3: Vedenie DNA
- 1Vytvorte vedecké skladovacie prostredie s malou fľašou. Nájdite malú, priehľadnú sklenenú fľašu, ktorú použijete na dlhodobejšie skladovanie. Môžete použiť úplne novú fľašu alebo znova použiť starú fľašu (napríklad takú, ktorá sa predtým používala na korenie). Ak ste sa rozhodli znova použiť starú fľašu, uistite sa, že je vo vnútri úplne čistá a že štítok bol odstránený. Naplňte fľašu izopropylalkoholom.
- Obchod dolár je skvelým miestom na vyhľadanie rad drobných sklenených nádob, ktoré môžu pracovať na tento účel.
- Izopropylalkohol nemusí byť v tomto kroku studený.
Existuje však spôsob, akým môžete extrahovať dostatočne veľký materiál DNA z ovocia, ako sú banány, kivi alebo jahody. - 2Ponorte drevenú špajľu do pohára a pomaly ju miešajte. Zapichnite drevenú špajľu do vysokého, úzkeho skla, kým sa špička špajle nenachádza v mieste, kde sa izopropylalkohol stretáva so zmesou banánov, slanej vody a mydla. Pomaly otáčajte alebo miešajte drevenou špajľou v tejto oblasti a sledujte, či sa do vrstvy alkoholu presunú bublinkové, vláknité kúsky. Vlákna DNA nechajte omotať okolo drevenej špajle.
- Tento krok poskytuje veľkú príležitosť na fotografiu DNA.
- 3Presuňte banánovú DNA do novovytvorenej skladovacej fľaše. Pomaly vyberte drevený špíz-s DNA obalenou okolo neho-z vysokého, úzkeho skla. Drevený špíz umiestnite do malej fľaše naplnenej izopropylalkoholom. Trochu zatočte drevenou špajľou, aby sa reťazec DNA mohol posunúť zo špajle do alkoholu.
- Akonáhle je DNA v alkohole, zaistite viečko na fľaši a nechajte ju tak dlho, ako budete chcieť.
Vytvorenie roztlačenej banánovej zmesi
- studený izopropylalkohol (> = 90%)
- 0,5 banánu, zrelého a olúpaného
- 1 US qt (950 ml) uzatvárateľné plastové mraziace vrecko
- odmerka
- 1/2 c (120 ml) horúcej vody
- 1 lyžička (4,9 ml) soli
- lyžica
- chňapky po rúre
- odmerné lyžice
- 1/2 čajové lyžičky (2,5 ml) prostriedok na umývanie riadu
Izolácia DNA banánu
- papierový kávový filter
- vysoký, úzky pohár na pitie
- elastické
- časovač
- fotoaparát / smartfón
Udržiavanie izolovanej DNA
- malá, priehľadná sklenená fľaša
- izopropylalkohol
- drevený špíz
Prečítajte si tiež: Ako identifikovať azbestový tmel?