Ako izolovať cholesterol z žlčových kameňov?
Nasledujúce kroky vám pomôžu izolovať cholesterol od žlčových kameňov.
Cholesterol je prírodný organický steroid a zlúčenina alkoholu, ktoré sa nachádzajú v bunkových membránach, kde sú základnými stavebnými prvkami bunkových membrán cicavcov a fungujú tak, aby zabezpečili správnu priepustnosť a tekutosť membrány. Okrem toho je cholesterol dôležitým stavebným kameňom syntézy žlčových kyselín, steroidných hormónov a niekoľkých vitamínov rozpustných v tukoch a nachádza sa v mieche, mozgu a nervovom tkanive.
Žlčník koncentruje žlč vyrobenú z pečene a uvoľňuje ju podľa potreby na trávenie. Žlčník tiež ukladá voľný cholesterol, ktorý sa môže zrážať a vytvárať žlčové kamene, ak jeho koncentrácia v žlči prekročí kritickú úroveň. Akumulácia žlčových kameňov môže dráždiť sliznicu žlčníka, čo spôsobuje bolesť, nevoľnosť a vracanie. Môžu tiež zablokovať žlčové cesty a spôsobiť komplikácie vyžadujúce chirurgický zákrok (cholecystektómiu) na odstránenie žlčníka s jeho žlčovými kameňmi. Nasledujúce kroky vám pomôžu izolovať cholesterol od žlčových kameňov.
- 1Získajte žlčové kamene. Na niektorých miestach môžete požiadať o žlčové kamene z chirurgického oddelenia alebo z oddelenia patológie nemocníc.
- 2Umiestnite žlčové kamene medzi listy papiera a potom ich rozdrvte ľahkým búšením kladivom.
- 3Sterilizujte žlčové kamene tým, že ich umyjete domácim bielidlom (5% roztok chlórnanu sodného).
- 4Odvážte drvené žlčové kamene. Zaznamenajte hmotnosť. Bude dôležité odhadnúť, koľko rozpúšťadla použiť.
- 5Pridajte drvené žlčové kamene do reakčnej nádoby.
- 6Do reakčnej nádoby pridajte 2-butanón (metyletylketón), asi 10 cm3 na gram rozdrvených žlčových kameňov a zohrejte na mierny var. Jemne premiešajte. Roztok bude mať špinavo žltý až hnedý vzhľad podľa žlčového pigmentu bilirubínu.
- 7Horúci roztok prefiltrujte cez papierový filtračný kotúč/kužeľ na lieviku do inej čistej nádoby. Na uľahčenie filtrácie naneste do nádoby s receptorom jemné vákuum. Nádobu na varenie opláchnite malým množstvom horúceho 2-butanónu a preneste opláchnutie do lievika. Cholesterol sa úplne rozpustí v 2-butanónovom rozpúšťadle, pričom počas tohto extrakčného procesu budú odfiltrované nerozpustné nečistoty (väčšinou pozostávajúce z bilirubínu, metabolitu hemoglobínu, ktorý dáva žlčovým kameňom hnedú farbu).
- Ak filtrát zostane silne zafarbený, pridajte aktívne uhlie a prefiltrujte.
- 8Do filtrátu pridajte metanol pozor: extrémne toxický „drevný alkohol“), asi 5 cm3 na gram počiatočného drveného žlčového kameňa.
- 9Filtrát znovu zohrejte na mierny var a potom po kvapkách pridávajte vodu, kým sa neobjaví veľmi slabý zákal. Cholesterol je veľmi rozpustný 2-butanón, menej rozpustný v metanole a nerozpustný vo vode. Pridanie vody ako zrazeniny do roztoku pomôže nasýtiť roztok cholesterolom na kryštalizáciu. Na premostenie rozpúšťadiel je potrebný metanol, pretože 2-butanón a voda nie sú navzájom veľmi miešateľné a metanol je miešateľný s vodou aj s 2-butanónom.
- 10Roztok opatrne vyberte z tepla. Okolo horúcej nádoby zabaľte vatovú výplň alebo uterák na izoláciu, aby bolo umožnené pomalé chladenie, a potom nechajte nerušene vychladnúť na izbovú teplotu.
- 11Keď je nádoba pri izbovej teplote, rozbaľte ju a ochladte v ľade, aby z roztoku vykryštalizovalo viac cholesterolu.
- 12Cholesterol zozbierajte filtráciou. Výťažok sú veľké bezfarebné kryštalické platne a ihly cholesterolu, asi 75% počiatočných drvených žlčových kameňov. Filtrát uložte. Pokiaľ je požadovaný vyšší výťažok, môžete získať druhú úrodu menšej čistoty varením filtrátu, pridaním vody po kvapkách a opakovaním kryštalizačného postupu.
Výťažok sú veľké bezfarebné kryštalické platne a ihly cholesterolu, asi 75% počiatočných drvených žlčových kameňov.
- Tento postup je najlepšie vykonať v kontrolovanom, dobre vetranom priestore.
- Vysoký cholesterol vo vysokom pomere LDL (zlý) k HDL (dobrý) cholesterol vedie k ukladaniu cholesterolu v žlčníku (čo vedie k vzniku žlčových kameňov) a na stenách tepien (ako plaketa obmedzujúca prietok krvi a spôsobujúca kôrnatenie) tepien, tj: ateroskleróza).
Môžu tiež zablokovať žlčové cesty a spôsobiť komplikácie vyžadujúce chirurgický zákrok (cholecystektómiu) na odstránenie žlčníka s jeho žlčovými kameňmi.
- Metanol aj 2-butanón sú veľmi prchavé a horľavé.
- Metanol je extrémne jedovatý a po požití spôsobuje slepotu.
- Butanón je dráždivý, ale vážne účinky na zdravie zvierat boli pozorované iba na veľmi vysokých úrovniach. Pri vdýchnutí tieto účinky zahŕňali vrodené chyby.
- Butanón je uvedený v tabuľke II ako prekurzor chemikálií, ktoré sa často používajú na nezákonnú výrobu omamných a psychotropných látok, pod medzinárodnou kontrolou, Medzinárodnou radou pre kontrolu omamných látok.
- Žlčové kamene
- Domáce bielidlo
- Mierka
- Reakčný kontajner
- 2-butanón
- Metanol
- Voda
- Horúci tanier
- Filtračné zariadenie (lievik, papierový filtračný kotúč/kužeľ, čistá nádoba na zachytenie filtrátu a vákuové odsávanie)
- Drevené uhlie (voliteľné)
Prečítajte si tiež: Ako citovať údaje v MLA?
